СДА (для определения спор мезофильных анаэробных бактерий)

ТУ 9229-027-04610209-94

Номенклатурный номер: 01120301

(производство ВНИИМС – филиал ФГБНУ «ФНЦ пищевых систем им. В.М. Горбатова» РАН)

ИНСТРУКЦИЯ по приготовлению и использованию сухой питательной среды для определения общего количества спор мезофильных анаэробных бактерий (СДА)

Приготовление рабочей среды: (50±5) г сухой среды вносят в (1±0,05) дм³ холодной воды (возможно использование как дистиллированной, так и предварительно подготовленной  водопроводной воды). Смесь тщательно перемешивают, нагревают и кипятят 3-5 мин, не допуская пригорания. В полученной среде проверяют рН и при необходимости доводят 20-30 %-ным раствором гидроокиси натрия или 20 %-ным раствором молочной или соляной кислоты до (7,3±0,1) ед. рН.

Готовую среду разливают в пробирки высоким столбиком по (12±1) см³, закрывают ватными пробками и стерилизуют при температуре (121±2) °С в течение (15±1) мин.

Готовая среда прозрачна и имеет красный цвет.

Использование рабочей среды: непосредственно перед применением пробирки со средой кипятят в водяной бане в течение (25±5) мин. для расплавления и удаления кислорода. По окончании тепловой подготовки среду охлаждают до предполагаемой температуры инкубирования.

Инокуляцию среды проводят в асептических условиях, внося посевной материал на дно пробирки, не допуская взбалтывания среды и попадания внутрь столбика среды воздуха из пипетки. Поверхность зараженных питательных сред покрывается слоем стерильного голодного агара, либо вазелинового масла, либо расплавленного парафина высотой 1,0-1,5 см для исключения возможности доступа воздуха.

При заполнении средой 2/3 общего объема пробирки (или более) допускается не наносить покрытие на поверхность питательной среды (посев в высокий столбик).

Посевы культивируют при (37±1) °С в течение 5 суток.

О наличии роста в питательной среде судят по частичному или полному изменению цвета среды с красного до желтого и образованию газа.

ВНИМАНИЕ! Среда полужидкая и содержит незначительное количество агара, образуя желеобразный студень. Поэтому, для избежания смешивания питательной среды с защитным слоем требуется осторожность.