ЛПС (Лактозно-пептонная среда)

ТУ 9291-090-04610209-2000

Номенклатурный номер: 01120205

(производство ВНИИМС – филиал ФГБНУ «ФНЦ пищевых систем им. В.М. Горбатова» РАН)

Для проведения микробиологического контроля необходимо располагать комплексом питательных сред, обеспечивающим контроль всех значимых групп микроорганизмов. Выбор питательной среды определяется специалистами предприятия, проводящими микробиологический контроль и отвечающими за безопасность и качество выпускаемой продукции.

Основное требование, предъявляемое к питательным средам, – обеспечение ростовых характеристик и специфичности на уровне арбитражных сред, т.е. сред, использование которых регламентировано нормативными документами (национальными стандартами).

Рабочие питательные среды для посевов готовят из сухих питательных сред, путем их растворения в воде с последующей стерилизацией в соответствии с инструкцией по приготовлению.

Для приготовления рабочих питательных сред используют водопроводную или дистиллированную воду. Водопроводную воду питьевого качества рекомендуется предварительно выдержать на свету в течение суток, прокипятить в открытом сосуде 30 мин и охладить до комнатной температуры. Активная кислотность воды должна составлять 7,2-7,6 ед. рН. При использовании дистиллированной воды необходимо контролировать и доводить рН среды, т.к. рН дистиллированной воды имеет кислые значения.

Подготовленную воду используют для приготовления питательных сред и растворов для разведений.

Определение активной кислотности (рН) питательных сред

Определение активной кислотности (рН) питательных сред проводят с помощью анализатора потенциометрического для контроля рН по прилагаемым инструкциям. Ориентировочное определение активной кислотности (рН) питательных сред может проводиться с помощью индикаторных бумажек или готового универсального индикатора.

Контроль качества рабочих питательных сред

Качество вновь приготовленных питательных сред проверяют путем параллельного посева одних и тех же проб на новую и ранее используемую среду. Результат считается удовлетворительным при получении данных одного порядка.

Контроль стерильности рабочих питательных сред осуществляют путем термостатирования пробы среды при 37 °С в течение 48 ч. Если после термостатирования на средах отсутствуют признаки роста, то среда считается стерильной.

Хранение рабочих питательных сред

Если особые условия хранения конкретной рабочей питательной среды не оговорены в инструкции по ее применению, то среды хранят в холодильнике не более 3 мес. или при температуре 18-23 °С не более 1 мес. при условии сохранения внешнего вида среды.

ИНСТРУКЦИЯ по приготовлению и использованию лактозо-пептонной среды (ЛПС)

(сухая среда содержит индикатор)

ГПС используют для контроля БГКП в воде в соответствии с ГОСТ 18963-73, МУК 4.2.1018-01 и МР 2.3.2.2327-08

Среду готовят двух видов: нормальную и концентрированную.

Концентрированная среда: к 20 г сухой среды добавляют 100 см³ нагретой до температуры 90-95 °С питьевой воды при постоянном перемешивании до полного растворения порошка и получения прозрачного раствора темно-бурого цвета. Необходимо контролировать рН готовой среды и в случае необходимости доводить до уровня 7,2-7,6 ед. рН. Готовую среду разливают по 10 см³ в колбы и по 1 см³ в пробирки с комочками ваты.

Среда нормальной концентрации: к 10 см³ концентрированной питательной среды добавляют 90 см³ питьевой воды. Готовую среду разливают по 10 см³ в пробирки с поплавками или комочками ваты.

Среду стерилизуют в автоклаве при 112 °С (давление - 0,5 атм) в течение 12 мин.

Посев проводят путем внесения в готовую среду определенного объема испытуемой воды и инкубируют при температуре (37±1) °С 48 ч.

Признак роста БГКП – изменение окраски среды с бурой, зеленой или голубой (в зависимости от ее концентрации) на желтую, помутнение и появление газа (поднятие комочка ваты).

ВНИМАНИЕ! Нарушение режима стерилизации ведет к снижению качества среды.